Estudo do potencial antifúngico e do mecanismo de ação do timol contra cepas de Candida parapsilosis resistentes ao fluconazol e a anfotericina B / Study of the antifungal potential and mechanism of action of thymol against strains of Candida parapsilosis resistant to fluconazole and amphotericin B

Objetivo: investigar a suscetibilidade de cepas fúngicas de Candida parapsilosis isoladas de sangue humano frente ao timol, bem como seu mecanismo de ação. Metodologia: foram utilizadas técnicas de microdiluição em placas de 96 poços para determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM). Além disso, foram realizados testes com o sorbitol e o ergosterol para investigar a ação do timol na parede e na membrana celular fúngica respectivamente. Resultados: nos testes de CIM e CFM, foi observado que as cepas de C. parapsilosis são resistentes ao fluconazol e a anfotericina B, no entanto, o timol desempenhou efeito fungicida com razão CFM/CIM entre 1 e 2. Além disso, a CIM do timol não aumentou quando o sorbitol ou o ergosterol foi adicionado no meio, sugerindo fortemente que este monoterpeno não age na parede celular fúngica ou por ligação ao ergosterol na membrana plasmática. Conclusão: portanto, esses resultados contribuem para a elucidação do mecanismo de ação do timol, sugerindo outros possíveis alvos de interação fármaco-receptor. No entanto, mais investigações de caráter enzimático e molecular em modelos in vitro são necessários para que se possa elucidar completamente o modo de ação desse promissor monoterpeno.

Objective: to investigate the susceptibility of fungal strains of Candida parapsilosis isolated from human blood against thymol, as well as its mechanism of action. Methodology: microdilution techniques were used in 96-well plates to determine minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC). In addition, tests were performed with sorbitol and ergosterol to investigate the action of thymol on the wall and on the fungal cell membrane respectively. Results: in the CIM and CFM tests, it was observed that C. parapsilosis strains are resistant to fluconazole and amphotericin B, however, thymol had a fungicidal effect with MFC/MIC ratio between 1 and 2. In addition, thymol MIC did not increase when sorbitol or ergosterol was added in the medium, strongly suggesting that this monoterpene does not act on the fungal cell wall or by binding to ergosterol on the plasma membrane. Conclusion: therefore, these results contribute to the elucidation of the mechanism of action of thymol, suggesting other possible targets of drug-receptor interaction. However, further investigations of enzymatic and molecular character in in vitro models are necessary to fully elucidate the mode of action of this promising monoterpene.

Repercussão da microbiota intestinal na modulação do sistema nervoso central e sua relação com doenças neurológicas / Repercussion of the intestinal microbiota in modulation of the central nervous system and its relation with neurological diseases

Introdução: a microbiota intestinal representa agrupamentos de micro-organismos encarregados de exercerem várias atividades indispensáveis para a regulação da homeostase. Esta, além da manutenção funcional do trato gastrointestinal (TGI), faz interferência na regulação do eixo de conexão entre o sistema nervoso entérico (SNE) com sistema nervoso central (SNC), denominado eixo intestino-cérebro, sendo uma comunicação bidirecional. Objetivo: identificar o papel da microbiota intestinal no processo de saúde e doença do hospedeiro humano, indispensável ao estudo de infecções e desordens do sistema nervoso entérico e sua relação com patologias neurológicas. Metodologia: foi realizado revisão integrativa da literatura nas bases de dados Scientific Eletronic Library Online (SciELO) e Literatura Latino Americana e do Caribe de Informação em Ciências da Saúde (LILACS), Medical Literature Analysis and Retrieval System Online (MEDLINE), além da Medical Publisher (PubMed). Resultados: constatou-se que a microbiota intestinal exerce influência sobre a cognição, o comportamento e também sobre o desenvolvimento neural. Além disso, a perda da homeostase do eixo intestino-cérebro pode contribuir para o surgimento de doenças mentais. Conclusão: através do estudo do eixo intestinocérebro, fica evidente a atuação da microbiota intestinal na manutenção da homeostase do SNC, bem como o seu envolvimento em várias disfunções, afetando o sistema nervoso e os intestinos, evidenciando uma via de comunicação bidirecional. Esse mecanismo é efetuado através de um sistema complexo de vias envolvendo os diversos componentes do sistema nervoso, endócrino e imunológico.

Introduction: the intestinal microbiota represents clusters of microorganisms that perform various activities that are essential for regulating homeostasis. This, in addition to the functional maintenance of the gastrointestinal tract (GIT), interferes in the regulation of the connection axis between the enteric nervous system (SNE) with the central nervous system (CNS), called the gut-brain axis, being a bidirectional communication. Objective: to identify the role of the intestinal microbiota in the health and disease process of the human host, indispensable for the study of infections and disorders of the enteric nervous system and its relation with neurological pathologies. Methodology: an integrative review of the literature was carried out in the Scientific Electronic Library Online (SciELO) and Latin American and Caribbean Literature on Health Sciences Information (LILACS), Medical Literature Analysis and Retrieval System Online (MEDLINE), as well as Medical Publisher (PubMed). Results: it was verified that the intestinal microbiota influences cognition, behavior and also neural development. In addition, the loss of intestinal-brain axis homeostasis may contribute to the onset of mental illness. Conclusion: through the study of the intestine-brain axis, the intestinal microbiota performance in the maintenance of CNS homeostasis is evident, as well as its involvement in various dysfunctions, affecting the nervous system and the intestines, evidencing a bidirectional communication pathway. This mechanism is effected through a complex system of pathways involving the various components of the nervous, endocrine and immune systems.

Atividade anti-Candida tropicalis dos enantiômeros (R)-(+) ­ & (S)-(-) ­ citronelal em associação com cetoconazol / Anti-Candida tropicalis activity of (R)-(+) ­ & (S)-(-) ­ citronellal enantiomers in combination with ketoconazole

Introdução: aproximadamente 75% das mulheres saudáveis experimentam pelo menos um episódio sintomático de candidíase vulvovaginal (CVV) durante sua vida. Objetivo: avaliar a atividade antifúngica contra cepas de C. tropicalis dos enantiômeros (R)-(+) ­ e (S)-(-)-citronelal [(R)-(+) ­ e (S)-(-)-CT] em associação com cetoconazol. Metodologia: o efeito antifúngico de ambos os enantiômeros foram quantificados e classificados como fungicida ou fungistático a partir dos resultados obtidos da microdiluição em meio líquido RPMI1640 para a obtenção da concentração inibitória mínima (CIM) e da concentração fungicida mínima (CFM). Foram realizados ensaios de associação do antifúngico padrão, cetoconazol com os fitoconstituintes por difusão em Agar e os resultados foram classificados como sinérgicos, antagônicos e indiferentes. Resultados: a CIM50 e a CFM50 dos compostos (R)-(+) ­ e (S)-(-)-citronelal foram respectivamente 16 e 64µg/mL e 2×CIM. Houve sinergismo para todas as cepas testadas com ambos os compostos, porém com maior efeito do enantiômero (S)-(-)-CT sobre as cepas LM 665 e LM 255 em relação ao enantiômero (R)-(+)-CT. Conclusão: os compostos naturais deste estudo mostraram efeito fungicida sobre as cepas testadas, bem como efeito sinérgico significativo quando associado ao cetoconazol

Study of the antifungal potential of (r)-(+)-citronellal and its association with therapeutic agents used in the treatment of vulvovaginal candidiasis / Estudo do potencial antifúngico do (r)-(+)-citronelal e sua associação com agentes terapêuticos utilizados no tratamento da candidíase vulvovaginal

Vulvovaginal candidiasis (VVC) is a common fungal infection that affects healthy women of all ages. At least 75% of women will develop one or more infections once during their lifetime, with 6 to 9% of those individuals developing recurrent infections. In view of this context, this study sought to evaluate the antifungal potential of the isolated (R)-(+)-citronellal [(R)-(+)-CT] and associated to therapeutic agents of clinical importance. The enantiomer was solubilized in tween 80 and dimethylsulfoxide (DMSO). Posteriorly diluted in sterile distilled water up to the concentration of 2048µg/mL. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the product was determined by microdilution in RPMI-1640 obtaining dilutions of 1024-4µg/mL. The minimum fungicidal concentration (MFC) was determined by the Sabouraud dextrose agar (SDA) depletion technique from aliquots of 1µL of the MIC, MIC × 2 and MIC × 4. The MIC and the MFC values of (R)-(+)-CT for 90% of the C. albicans strains were 16 and 32µg/mL respectively. In the susceptibility test, C. albicans presented a high resistance to fluconazole and to itraconazole, 12 (92.30%) of the strains. However, for ketoconazole and miconazole the resistance was of 4 (30.76%) and 3 (23.07%) of the strains respectively. In the combination testing of the (R)-(+)-CT with ketoconazole and miconazole, the resistance was completely reverted. For fluconazole and itraconazole, the resistance was reverted in 9 (75%) and 7 (58.33%) of the strains respectively. The (R)-(+)-CT presented fungicide activity with MFC of MIC × 2. When in combination with ketoconazole, fluconazole, itraconazole and miconazole increased the inhibition zones of these antifungal drugs, reducing the resistance against C. albicans.

Candidíase vulvovaginal (CVV) é uma infecção fúngica comum que afeta mulheres saudáveis de todas as idades. Pelo menos 75% das mulheres irão desenvolver uma ou mais infecções uma vez durante a vida, com 6 a 9% dos indivíduos desenvolvendo infecções recorrentes. Diante deste contexto, buscou-se avaliar neste estudo o potencial antifúngico do (R)-(+)-citronelal [(R)-(+)-CT] isolado e associado a agentes terapêuticos de importância clínica. O enantiômero foi solubilizado em tween 80 e dimetilsulfóxido (DMSO). Posteriormente diluiu-se em água destilada estéril até a concentração de 2048µg/mL. A concentração inibitória mínima (CIM) do produto foi determinada por microdiluição em meio RPMI-1640 obtendo diluições de 4-1024µg/mL. A concentração fungicida mínima (CFM) foi determinada pela técnica de esgotamento em agar Sabouraud dextrose (ASD) a partir de alíquotas de 1mL da CIM, CIM × 2 e CIM × 4. A CIM e a CFM do (R)-(+)-CT para 90% das cepas de C. albicans foram 16 e 32µg/mL respectivamente. No ensaio de suscetibilidade, C. albicans apresentou alta resistência ao fluconazol e ao itraconazol, 12 (92.30%) das cepas. No em tanto, para o cetoconazol e o miconazol a resistência foi de 4 (30.76%) e 3 (23.07%) das cepas respectivamente. No ensaio de combinação do (R)-(+)-CT com cetoconazol e miconazol, a resistência foi completamente revertida. Para o fluconazol e o itraconazol, a resistências foi revertida em 9 (75%) e 7 (58.33%) das cepas respectivamente. O (R)-(+)-CT apresentou atividade fungicida com CFM igual à CIM × 2. Quando em combinação com cetoconazol, fluconazol, itraconazol e miconazol ampliou as zonas de inibição desses antifúngicos, diminuindo a resistência contra C. albicans.

Antifungal effect of 7-hydroxycitronellal against C. Tropicalis strains: an in vitro approach / Efeito antifúngico do 7-hidroxicitronelal contra cepas de C. Tropicalis: uma abordagem in vitro

The fungi of the genus Candida play a relevant role in the emergence of oral infections and are increasingly more frequent the cases of infections by non-albicans strains. In light of this context and the need for new alternatives to the antimicrobial therapy, the monoterpene [7-hidroxicitronelal] (7-HO) was evaluated for its antifungal effects. For the obtainment of the MIC and MFC values the broth microdilution method was used. The MIC and the MFC of this monoterpene for 60% of the tested strains was of 256µg/mL and 512µg/mL respectively. Furthermore, the standard antifungal nystatin (100UI/mL) was used as positive control for the inhibition of fungal growth. Therefore, were used 4 clinical strains of the species tropicalis (LM 06, LM 14, LM 31 and LM 36) and a standard strain (C. tropicalis ATCC 13803), originated from the Mycology collection of the Mycology Laboratory (LM) of the Health Sciences Center (CCS) of the Federal University of Paraiba (UFPB). The results obtained in this study showed fungicide activity of the compound (7-OH) against the strains of C. tropicalis.

Os fungos do gênero Candida tem um papel relevante no aparecimento de infecções orais e são cada vez mais frequentes os casos de infecções por cepas não-albicans. Diante deste contexto e da necessidade de novas alternativas para a terapia antimicrobiana, o monoterpeno [7-hidroxicitronelal] (7-HO) foi avaliado pelos seus efeitos antifúngicos. Para a obtenção dos valores da CIM e da CFM foi utilizado o método da microdiluição em caldo. A CIM e a CFM deste monoterpeno para 60% das cepas testadas foram de 256µg/mL e 512µg/mL respectivamente. Além disso, o antifúngico padrão nistatina (100UI/mL) foi utilizado como controle positivo para inibir o crescimento fúngico. Por tanto, foram utilizadas 4 cepas clínicas da espécie tropicalis (LM 06, LM 14, LM 31 e LM 36) e uma cepa padrão (C. tropicalis ATCC 13803), oriundas da Micoteca do Laboratório de Micologia (LM) do Centro de Ciências da Saúde (CCS) da Universidade Federal da Paraíba (UFPB). Os resultados obtidos neste estudo mostraram atividade fungicida do composto (7-OH) contra as cepas de C. tropicalis.